wb牛奶封闭温度
室温、4度或着37度的封闭时间。
1、如果是封闭时一般用5%脱脂wb牛奶,封闭温度为室温1-2h。
2、如果是wb牛奶用1-5%BSA或1%无蛋白封闭液,需要封闭温度为4度,并过夜。
3、如果wb牛奶全部用PBS稀释,封闭温度为37度,半个小时就可以。
做wb实验时为什么要用脱脂奶粉的tbst封闭转移膜两小时
封闭的概念是,首先pvdf膜与所有蛋白是有很强的结合力,包括抗体,蛋白电泳转膜后,pvdf膜上会结合分离的蛋白,但这些蛋白的数量比较少,不足以饱和膜上所有的蛋白结合位点,如果不封闭直接孵育抗体,抗体就会与这些位点结合,所以需要用杂蛋白封闭膜上的空余位点。封闭相当于在膜上覆盖一层蛋白,这样抗体与膜本身之间就没有结合力了,只会与膜上特异性的蛋白结合,从而实现特异性的免疫识别。
封闭后的最好可以洗涤一下
WB封闭温度和时间
WB封闭温度是38度1个小时就可以了。
如果是自己配置的封闭液,最好过滤一下以消除固体杂质。
wb牛奶封闭45min可以吗
不可以。wb牛奶封闭45min会增加出现杂带的概率,是不可以的。其全称为westernblot牛奶,是一种极为常见的封闭剂,效果相当的好。
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